¿Cuáles son las claves para los buenos datos de QPCR?

Algunas pautas generales para obtener buenos datos de qPCR:

1. ARN de alta calidad: es esencial usar ARN de alta calidad con alta pureza e integridad para las reacciones de qPCR, ya que la calidad del ARN puede afectar la precisión y reproducibilidad de los resultados.

2. curvas de calibración: Es importante incluir curvas estándar para cada ensayo de qPCR para garantizar una cuantificación precisa del gen diana.

3. Controles apropiados: junto con las muestras desconocidas, deben incluirse controles positivos y negativos apropiados, como controles que no sean de plantilla, para detectar cualquier contaminación o amplificación de productos no específicos.

4. Optimización de las condiciones de reacción: Las condiciones para ejecutar un ensayo qPCR deben optimizarse, incluida la temperatura de recocido, la concentración del cebador y el volumen de reacción.

5. normalización de los datos: La normalización de los datos es esencial para tener en cuenta las diferencias entre las muestras y minimizar la variabilidad.

6. Replicaciones: La ejecución de réplicas para cada muestra ayuda a reducir la variabilidad y aumentar la confianza en los resultados.

7. Análisis estadístico: Debe realizarse un análisis estadístico adecuado para determinar la importancia de los resultados y comparar entre grupos.

PREV: ¿Cómo elegir los tubos de centrífuga correctos?

SIGUIENTE: Factores que afectan la precisión del pipettor