Procesos estándar para la reacción PCR

El PROCESO DE PCR estándar se divide en tres pasos:

Desnaturalización del ADN: (90 °C-96 °C): La plantilla de ADN de doble hebra sufre una escisión del enlace de hidrógeno bajo acción térmica, formando ADN monocatenario

Recocido: (60 ℃ -65 ℃): a medida que disminuye la temperatura del sistema, el cebador se une a la plantilla de ADN, formando una doble hebra local.

Extensión: (70 ℃ -75 ℃): Bajo la acción de la enzima Taq (alrededor de 72 ℃, con la mejor actividad), el dNTP se utiliza como material de partida, extendiéndose desde el extremo 3 'del cebador en la dirección del extremo 5 '→ 3', para sintetizar cadenas de ADN complementarias a la plantilla.

Después de cada ciclo de desnaturalización, recocido y extensión, el contenido de ADN se duplica. Hoy en día, algunas PCR pueden replicarse en poco tiempo incluso si la actividad de la enzima Taq no es óptima debido a la corta región de amplificación. Por lo tanto, se puede utilizar un método de dos pasos, que implica recocido y estiramiento simultáneamente entre 60 y 65 ℃, para reducir un aumento de temperatura y disminuir el proceso y mejorar la velocidad de reacción.

PREV: ¿Para qué son las puntas de pipeta de filtro?

SIGUIENTE: Consejos de pipeta de automatización para la estación de trabajo Hamilton